การทดสอบข้าม: สิ่งที่พวกเขาสำหรับเทคนิคและรากฐานขั้นตอน

การ ทดสอบข้าม เป็นชุดของการศึกษาในห้องปฏิบัติการที่มีการดำเนินการเพื่อตรวจสอบว่าผลิตภัณฑ์เลือดจากผู้บริจาค (ส่วนใหญ่เลือดทั้งหมดและสมาธิกลม) เข้ากันได้กับเลือดของผู้รับ

เป็นการทดสอบเพิ่มเติมนอกเหนือจากความเข้ากันได้ของ ABO และปัจจัย Rh เหตุผลของการข้ามการทดสอบคือบางครั้งบุคคลสองคน (ผู้บริจาค - ผู้รับ) อาจมีกลุ่ม ABO และ Rh เดียวกัน แต่เลือดของพวกเขายังไม่เข้ากัน

ความไม่ลงรอยกันดังกล่าวเกิดจากการมีแอนติบอดีต่อต้านโปรตีนเซลล์เม็ดเลือดแดงที่รู้จักกันในชื่อแอนติเจนเล็กน้อย แอนติเจนเหล่านี้จะไม่ได้รับการประเมินเป็นประจำเช่นเดียวกับกลุ่มเลือด (ABO) และปัจจัย Rh

นี่เป็นเพราะแอนติเจนเล็กน้อยนั้นมีความถี่น้อยกว่ามากและมีการแสดงออกของตัวแปรในแต่ละบุคคลดังนั้นจึงเป็นไปไม่ได้ที่จะจัดกลุ่มพวกมันเป็นหมวดหมู่ตามที่ทำกับกลุ่มและปัจจัย Rh

แต่เซลล์เม็ดเลือดแดงของผู้บริจาคจะผสมกับเซรุ่มผู้ป่วย (การทดสอบความเข้ากันได้ที่สำคัญ) และเซลล์เม็ดเลือดแดงของผู้ป่วยด้วยเซรุ่มผู้บริจาค (การทดสอบความเข้ากันได้เล็กน้อย) เพื่อตรวจหาปฏิกิริยาของแอนติเจนและแอนติบอดี

เมื่อมีแอนติบอดีต่อแอนติเจนเล็กน้อยไม่ว่าจะในซีรัมของผู้ป่วยหรือผู้บริจาคการทดสอบนั้นก็จะเป็นผลบวกดังนั้นในกรณีส่วนใหญ่ไม่สามารถถ่ายเลือดในหน่วยเฉพาะได้

กลุ่ม ABO

เพื่อให้เข้าใจได้ดีว่าการตอบโต้ข้ามได้รับการปฏิบัติก่อนจำเป็นต้องรู้พื้นฐานเกี่ยวกับกลุ่มเลือด

ในแง่นี้สิ่งที่สำคัญที่สุดคือการรู้ว่าเลือดสามารถแบ่งออกเป็นสี่กลุ่ม: A, B, AB และ O.

แต่ละกลุ่มเหล่านี้แสดงออกบนพื้นผิวของเซลล์เม็ดเลือดแดงโปรตีนเฉพาะ (แอนติเจน) ซึ่งถูกระบุว่าเป็นองค์ประกอบต่างประเทศโดยแอนติบอดีของผู้รับที่มีศักยภาพของกลุ่มที่แตกต่างกัน

ปฏิกิริยาที่โดดเด่นที่สุดของปฏิกิริยาแอนติเจนและแอนติบอดีในความเข้ากันได้ของเลือดคือไม่จำเป็นต้องมีการสัมผัสกับแอนติเจนก่อนเพื่อให้แอนติบอดีมีอยู่ นี้เรียกว่าแอนติบอดีธรรมชาติ

แอนติบอดีตามธรรมชาติ

โดยทั่วไปสำหรับแอนติบอดีที่มีอยู่ในร่างกายของแต่ละคนเป็นสิ่งจำเป็นที่เซลล์เม็ดเลือดขาวเคยสัมผัสกับแอนติเจนมาก่อน

ซึ่งหมายความว่าในการติดต่อครั้งแรกระหว่างแอนติเจนต่างประเทศและสิ่งมีชีวิตไม่มีแอนติบอดีเนื่องจากสิ่งเหล่านี้จะถูกสร้างขึ้นในภายหลังหลังจากการติดต่อครั้งแรก ดังนั้นจึงเป็นไปไม่ได้ที่ระบบภูมิคุ้มกันจะมีแอนติบอดีต่อต้านเช่นไวรัสชนิดใดชนิดหนึ่งหากไม่เคยสัมผัสกับมันมาก่อน

ข้อยกเว้นเดียวกับที่กล่าวข้างต้นคือแอนติเจนต่อต้าน AB ในกรณีเหล่านี้บุคคลนั้นมีแอนติบอดีต่อต้านแอนติเจนที่เซลล์เม็ดเลือดแดงของพวกเขาไม่มีแม้ว่าพวกเขาจะไม่เคยสัมผัสกับเซลล์เม็ดเลือดแดงของบุคคลอื่น นี้เรียกว่าแอนติบอดีธรรมชาติ

แอนติเจนและแอนติบอดีที่เกี่ยวข้องกับกรุ๊ปเลือด

กลุ่มเลือดถูกกำหนดในกรณีของระบบ ABO โดยการปรากฏตัวของแอนติเจนที่เฉพาะเจาะจง (A หรือ B) ในเยื่อหุ้มเซลล์เม็ดเลือดแดงและในทางตรงกันข้ามแอนติบอดีต่อแอนติเจนที่ขาดอยู่ในเยื่อหุ้มเม็ดเลือดแดง

ดังนั้นคนที่มีกรุ๊ปเลือด A จะแสดงแอนติเจน A บนพื้นผิวของเซลล์เม็ดเลือดแดงของพวกเขาในขณะที่ในซีรัมนั้นจะมีแอนติบอดีต่อต้าน B

ในทางตรงกันข้ามในผู้ป่วยกลุ่ม B พบแอนติเจน B ในขณะที่แอนติบอดีเป็นแอนติบอดี

ตอนนี้ผู้ป่วยเลือด AB มีแอนติเจนทั้ง A และ B ดังนั้นจึงไม่มีแอนติบอดี้เนื่องจากการทำเช่นนั้นจะทำลายเซลล์เม็ดเลือดแดงของบุคคลนั้น

ตรงกันข้ามเกิดขึ้นในกลุ่ม O ซึ่งเยื่อหุ้มเซลล์เม็ดเลือดแดงไม่แสดงแอนติเจนใด ๆ ของทั้งสอง (ไม่ A หรือ B) ในขณะที่ในซีรั่มมีแอนติบอดีต่อต้าน A และต่อต้าน B

ความไม่เข้ากันของกลุ่ม ABO

จากข้างต้นสามารถตรวจสอบความเข้ากันได้ของกลุ่มเลือด ABO ได้อย่างง่ายดายเนื่องจากแอนติเจนของเยื่อหุ้มเซลล์เม็ดเลือดแดงเป็นแอนติบอดีที่รู้จักกันโดยอัตโนมัติในซีรัม ดังนั้น:

- Blood A เข้ากันได้กับกลุ่ม A และกลุ่ม O

- กรุ๊ปเลือด B เข้ากันได้กับกรุ๊ปเลือด B และ O

- ผู้ที่มีกลุ่ม O สามารถรับเลือด O (เนื่องจากมีแอนติบอดีต่อต้าน A และแอนตี้ - บี) แม้ว่ากลุ่มอื่น ๆ จะได้รับเลือดของพวกเขาโดยไม่มีปัญหาเนื่องจากขาดแอนติเจน

- ในที่สุด ผู้ที่มีกรุ๊ปเลือด AB สามารถรับเลือดจากกลุ่มอื่นทั้งหมด (A, B, O และแน่นอน AB) เนื่องจากพวกเขาไม่มีแอนติบอดีต่อแอนติเจนใด ๆ อย่างไรก็ตามมีเพียงคน AB เท่านั้นที่สามารถรับเลือด AB เนื่องจากกลุ่มอื่น ๆ ทั้งหมดมีแอนติบอดีที่จะทำลายเซลล์เม็ดเลือดแดงเหล่านี้

แอนติเจนเล็กน้อย

เช่นเดียวกับกลุ่ม ABO ชุดของโปรตีนที่ทำหน้าที่เป็นแอนติเจนสามารถพบได้บนพื้นผิวของเม็ดเลือดแดงเช่นเดียวกับแอนติเจนของกลุ่ม ABO

อย่างไรก็ตามแอนติเจนเหล่านี้ไม่ได้เกิดขึ้นในทุกคน การรวมกันของมันนั้นต่างกันและการแทรกซึม (ระดับการแสดงออกของโปรตีน) เป็นตัวแปรดังนั้นจึงเป็นไปไม่ได้ที่จะจัดกลุ่มเป็นกลุ่มเช่นกลุ่มที่มีอยู่สำหรับ ABO และ Rh จากตรงนั้นมันได้ชื่อมาจาก "แอนติเจนเล็กน้อย" หรือที่เรียกว่า "แอนติเจนต่ำที่มีอุบัติการณ์"

แม้ว่าพวกเขาจะไม่ได้บ่อย แต่อาจมีแอนติบอดีธรรมชาติกับแอนติเจนเล็กน้อย ในหมู่พวกเขาที่พบบ่อยที่สุดคือ Lewis, MNSs, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb และ Kidd พวกเขาทั้งหมดรับผิดชอบปฏิกิริยา hemolytic และ post-transfusional ที่ร้ายแรงมาก

นอกจากนี้อาจมีกรณีของการทำให้ไวต่อแอนติเจนเล็กน้อยโดยการติดต่อก่อนหน้านี้ทั้งที่มีโปรตีนแอนติเจนดังกล่าวเนื่องจากการถ่ายก่อนหน้าหรือเนื่องจากการข้ามภูมิคุ้มกัน

ภูมิคุ้มกันข้าม

ว่ากันว่ามีภูมิคุ้มกันข้ามเมื่อสองแอนติเจนจากสองแหล่งที่แตกต่างกัน (ตัวอย่างเช่นเซลล์เม็ดเลือดแดงและแบคทีเรีย) จะคล้ายกันมากถึงจุดที่แอนติบอดีต่อหนึ่งแอนติเจนโปรตีนดังกล่าวยังทำปฏิกิริยากับคนอื่นเพราะพวกเขาเกือบจะเหมือนกัน .

เพื่อให้เข้าใจได้ดีขึ้นให้นำตัวอย่างสมมุติก่อนหน้านี้ (แอนติเจนของเซลล์เม็ดเลือดแดงและแบคทีเรีย) ไม่ว่าในกรณีใดก็ตามแอนติบอดีธรรมชาติจะมีอยู่ แต่ถ้ามีคนสัมผัสกับแบคทีเรียพวกเขาจะสร้างแอนติบอดีต่อมัน

แอนติบอดีดังกล่าวจะตอบสนองต่อเซลล์เม็ดเลือดแดงในภายหลังหากแอนติเจนของสิ่งนี้คล้ายกับแบคทีเรียที่เหนี่ยวนำให้เกิดการสร้างแอนติบอดี

หากสิ่งนี้เกิดขึ้นเซลล์เม็ดเลือดแดงที่มีโปรตีนแอนติเจนเฉพาะนั้นจะไม่สามารถให้กับผู้ที่มีแอนติบอดีดังเช่นที่จะถูกปฏิเสธ นี่คือความสำคัญของการเกิดปฏิกิริยาข้าม

การทดสอบข้ามมีไว้เพื่ออะไร

เนื่องจากเป็นไปไม่ได้ที่จะจำแนกลักษณะเลือดของบุคคลต่าง ๆ ในกลุ่มโดยอาศัยแอนติเจนตัวเล็ก ๆ วิธีเดียวที่จะรู้ได้ว่าในเลือดของคนมีแอนติบอดีต่อแอนติเจนเล็กน้อยของเซลล์เม็ดเลือดแดงของอีกคนหนึ่งคือผ่านการทดสอบข้าม .

ในกรณีที่มีแอนติบอดี้เกิดขึ้นปฏิกิริยาการแตกของเม็ดเลือดแดงหรือการเกาะติดกันจึงสรุปได้ว่าปฏิกิริยาดังกล่าวเป็นบวก นั่นคือมีแอนติบอดีต่อแอนติเจนเล็กน้อย (แม้ว่าจะไม่ทราบแน่ชัดว่ามีอะไร) มิฉะนั้นการทดสอบจะเป็นลบ

มูลนิธิ

การทดสอบกากบาทขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาแอนติเจนและแอนติบอดี ดังนั้นกับพวกเขาจึงเป็นไปได้ที่จะตรวจสอบว่าในซีรั่มของตัวรับมีแอนติบอดีต่อแอนติเจนของเซลล์เม็ดเลือดแดงของผู้บริจาค (หรือในทางกลับกัน) ทำให้เกิดปฏิกิริยาแอนติเจนและแอนติบอดี

หากไม่มีแอนติบอดีจะไม่เกิดปฏิกิริยาใด ๆ และรายงานการทดสอบว่าเป็นลบ ตรงกันข้ามถ้าปฏิกิริยาเป็นบวก (มีภาวะเม็ดเลือดแดงแตกหรือการเกาะติดกันในระหว่างการทดสอบ) ก็สามารถสรุปได้ว่าแอนติบอดีที่มีอยู่

ในเรื่องนี้มันเป็นสิ่งสำคัญที่จะต้องทราบว่าอาจมีแอนติบอดีต่อเซลล์เม็ดเลือดแดงทั้งในผู้บริจาคและเซรุ่มผู้รับ นี่คือเหตุผลที่มีปฏิกิริยาข้ามสองประเภท

ประเภทของปฏิกิริยาข้าม

อาจเป็นไปได้ว่ามีแอนติบอดีต่อเม็ดเลือดแดงของผู้บริจาคในซีรัมของผู้ป่วย แต่สิ่งที่ตรงกันข้ามก็อาจเป็นจริงได้นั่นคือแอนติบอดีในซีรัมของผู้บริจาคกับเซลล์เม็ดเลือดแดงของผู้ป่วย

นั่นคือเหตุผลที่มีการทดสอบข้ามสองประเภท:

- ทดสอบข้ามที่ยิ่งใหญ่กว่า

- การทดสอบข้ามเล็กน้อย

ทั้งสองประเภทมีการดำเนินการเป็นประจำในธนาคารเลือดก่อนที่จะถ่ายผลิตภัณฑ์เลือดเนื่องจากหากการทดสอบใด ๆ เป็นบวกจะมีความเสี่ยงสูงต่อปฏิกิริยาการถ่ายที่อาจเป็นอันตรายต่อชีวิตของผู้ป่วย

ทดสอบข้ามมากขึ้น

ในการทดสอบนี้จะมีการประเมินว่ามีแอนติบอดีต่อเซลล์เม็ดเลือดแดงของผู้บริจาคในซีรัมของผู้รับหรือไม่

หากสิ่งนี้เกิดขึ้นผลิตภัณฑ์เลือดไม่สามารถบริหารได้เนื่องจากมีจำนวนแอนติบอดีจำนวนมากที่อยู่ในพลาสมาของผู้ป่วยจะทำลายเซลล์เม็ดเลือดแดงของผู้บริจาคอย่างรวดเร็วทำให้เกิดปฏิกิริยารุนแรงในร่างกายของผู้รับในกระบวนการ ปฏิกิริยาเหล่านี้รุนแรงมากจนสามารถคุกคามชีวิตคุณได้

การทดสอบข้ามเล็กน้อย

ในกรณีนี้มันจะถูกกำหนดถ้ามีแอนติบอดีในซีรัมผู้บริจาคเทียบกับเซลล์เม็ดเลือดแดงของผู้รับ

ถ้าเป็นเช่นนั้นแอนติบอดีจะเริ่มทำลายเม็ดเลือดแดงของตัวรับ อย่างไรก็ตามเนื่องจากปริมาณของแอนติบอดีมี จำกัด ปฏิกิริยาจึงมีความเข้มน้อยลง แม้ว่ามันจะยังคงเป็นอันตราย

ขั้นตอน

ทั้งการทดสอบข้ามที่สำคัญและเล็กน้อยถูกแบ่งออกเป็นสามขั้นตอน

- ซาลินา

- ความร้อนหรือการบ่ม

- คูมบ์ส

ในระยะแรกเซลล์เม็ดเลือดแดงและเซรั่มผสมในน้ำเกลือ หลังจากนั้นอัลบูมินจะถูกเพิ่มและตัวอย่างจะถูกบ่มที่37ºCเป็นเวลา 30 นาทีเพื่อดำเนินการในขั้นตอนสุดท้ายกับคูมบ์ส

เทคนิค

เทคนิคการข้ามการทดสอบนั้นค่อนข้างง่ายเนื่องจากมันเกี่ยวข้องกับการเพิ่มเซลล์เม็ดเลือดแดงของผู้บริจาคในซีรัมของผู้ป่วย (การทดสอบข้ามครั้งใหญ่) รวมถึงเม็ดเลือดแดงของผู้รับในซีรัมของผู้บริจาค (การทดสอบข้ามเล็กน้อย)

เพื่อที่จะชักนำให้เกิดปฏิกิริยาแอนติเจนและแอนติบอดีในระยะเวลาอันสั้นชุดของขั้นตอนมาตรฐานจะต้องปฏิบัติตาม ขั้นตอนเหล่านี้ถูกสรุปอย่างง่าย ๆ ด้านล่าง

โปรดทราบว่าในส่วนต่อไปนี้จะอธิบายการทดสอบความเข้ากันได้ที่มากขึ้นถึงแม้ว่าขั้นตอนจะเหมือนกันสำหรับการทดสอบความเข้ากันได้เล็กน้อย แต่การแลกเปลี่ยนต้นกำเนิดของเซลล์เม็ดเลือดแดงและซีรัม